Jak flexibilita enzymů z Bacillus circulans ovlivňuje jejich jedinečné schopnosti: Nové poznatky pro biotechnologie
Vědkyním z Laboratoře strukturní chemie PřF JU se společně s ostatními kolegy podařilo objasnit výsledky naší nejnovější studie, publikované v časopise Structure, s názvem: „Variabilní strukturální flexibilita izoforem β-galaktosidázy z Bacillus circulans určuje jejich jedinečné funkce“ (The variable structural flexibility of the Bacillus circulans β-galactosidase isoforms determines their unique functionalities).
Naše práce odhaluje, jak strukturální rozdíly mezi izoformami enzymu β-galaktosidázy ovlivňují jejich biochemické funkce, a zdůrazňuje roli proteinové flexibility v různých mechanismech enzymů. Tyto poznatky mají široké využití v biotechnologiích a vývoji účinnějších enzymů.
Co se zjistilo?
- β-Galaktosidáza z Bacillus circulans (BgaD) je klíčovým enzymem při syntéze β-galaktooligosacharidů (GOS), důležitých v potravinářství a farmacii.
- Izoforma A (BgaD-A) vykazuje jedinečné vlastnosti, které se liší od izoformy D (BgaD-D). Pomocí kryo-EM analýzy a srovnání s rentgenovými krystalografickými daty jsme odhalili zásadní strukturální rozdíly.
- BgaD-A obsahuje „Barierovou doménu 8“, která u BgaD-D chybí a blokuje přístup delších oligosacharidů do aktivního místa enzymu. Tato nová doména tak přispívá ke zvýšené selektivitě BgaD-A vůči kratším substrátům.
Klíčové poznatky:
- Flexibilita a nová doména: BgaD-A má flexibilní Big-4 doménu a unikátní „Barierovou doménu 8“, která omezuje přístup delším substrátům.
- Specifita substrátů: Aktivní místo BgaD-A preferuje kratší oligosacharidy, což bylo potvrzeno pomocí dokovacích simulací s laktózou a tetrasacharidy.
- Strukturální rozdíly vysvětlují různé funkce: Tyto rozdíly ovlivňují schopnost enzymu provádět transgalaktosylaci, klíčový krok při syntéze GOS.
Proč je to důležité?
Naše výsledky přispívají k lepšímu pochopení enzymové katalýzy a otevírají nové možnosti pro cílený návrh enzymů, které mohou produkovat specifické galaktooligosacharidy efektivněji a udržitelněji. To má přímé aplikace v potravinářském a farmaceutickém průmyslu.
Celý článek najdete zde:
The variable structural flexibility of the Bacillus circulans β-galactosidase isoforms determines their unique functionalities
Kontakt: Mgr. Barbora Kaščáková, Ph.D. (